フラスコ内の細胞培養は一般的な細胞培養消耗品であり、主にさまざまな浮遊細胞の培養に使用され、小容量のボトルは培地の準備または保管にも使用できます。 このような医学実験室の消耗品CHO細胞の培養で使用されます。 CHO細胞は、1957年に得られた形質転換細胞株であり、タンパク質の発現に広く使用されています。 CHO細胞懸濁液培養では、最初に室温で培地 (CD CHO) を拡張し、その温度を室温に戻し、30分以内に37 ℃ の振とう床予熱に移しました。 リサイクル液は、凍結保存されたチューブからシードセルSAPを予熱培地を含むフラスコ内の細胞培養液に移動させ、適切な量の栄養溶液を追加して開発を開始しました。 細胞回復の過程で無菌操作に注意を払う必要があります。凍結細胞の溶解速度は、ゆっくりとした加熱と細胞への損傷の細胞内の氷結晶の形成を避けるために速くなければなりません。 フラスコ内の細胞培養で2〜3日間培養した後、細胞密度が増加し、栄養素が徐々に枯渇するため、細胞を増殖させる必要があります。 増殖量は、セル密度に従って算出した。 反応器内の細胞の数に達したとき、培養を停止し、増殖のために反応器に接種した。 フラスコ内の細胞培養を用いてCHO細胞の懸濁培養を行う場合、一般的には、細胞の蓄積を防ぎ、その成長と繁殖に影響を与えるために、シェーカーの助けを借りて定期的に振る必要があります。 操作中は、細胞増殖に悪影響を及ぼす不適切な操作による細菌汚染の導入を避けるために、無菌性に注意を払う必要があります。
細胞増殖曲線は、細胞の絶対増殖数を決定するための一般的な方法であり、細胞の生存率を決定するための重要な指標です。 それはまた、培養細胞の生物学的特性の基本的なパラメータの1つです。 細胞成長曲線を決定する方法はたくさんあり、細胞培養バイアルによるカウントは一般的な方法です。 一般的に使用される成長曲線の方法は次のとおりです。ボトル内の細胞培養の同じ仕様で、同じ量の同じ世代細胞が接種され、細胞数本のボトルを取り出すために24時間ごとにトレーニングした後、アブシッサは時間を示します。 下部座標の異なる時間ログのセルの数、マーク、細胞成長曲線のさまざまなポイントでの直線、つまり細胞成長のダイナミクスを反映することができます。 細胞培養バイアルカウンティング法を使用して細胞増殖曲線を決定することは、培養細胞の生物学的特性の基本的なパラメーターを理解し、細胞増殖の絶対数を決定し、細胞生存率を判断することができるだけではありません。しかしまた细胞増殖に対する薬剤のような外国の要因の影响を定めるのに使用することができます。
